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IgGZERO（EndoS）和GlycINATOR（EndoS2）都是内切糖苷酶，均可快速水解IgG 的Fc 结构域上的N- 聚糖。

但是你知道吗？哪种内切糖苷酶可以去除人IgG上的所有高甘露糖型聚糖？哪种内切糖苷酶对杂合型聚糖更有效呢？

别着急，咱们接着往下看～

GlycINATOR（EndoS2）

GlycINATOR（EndoS2）是一种内切糖苷酶，可以迅速水解IgG中的Fc结构域的N-聚糖结构。

GlycINATOR在第一个乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）后切除N-聚糖。GlycINATOR可以有效地从IgG中去除高甘露糖型，以及复合型和杂合型的Fc 聚糖。该反应可在生理条件下快速、温和地进行。该酶作用于天然IgG，并且不需要去垢剂。

GlycINATOR通过减少由补体结合或交叉反应性引起的各种免疫测定中的副作用而成为一种有效的工具。

划重点

      · 对高甘露糖型和平分糖型有效

      · 快速去糖基化，操作时间仅30分钟

冻干粉——

GlycINATOR水解Fc的N-聚糖，包括高甘露糖型和平分型聚糖。该酶成品为冻干制剂，可以用于2 mg IgG的去糖基化反应。

固定化的GlycINATOR离心柱，GlycINATOR酶通过共价结合在琼脂糖小球上。这种固定化的GlycINATOR可以对Fc的N-聚糖去糖基化，而最终产品中不会含有这种酶。

IgGZERO（EndoS）

IgGZERO（EndoS）是对天然IgG 具有独特特异性的内切糖苷酶。它对于Fc 结构域上的N- 聚糖具有特异性，在第一个乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）之后切除N- 聚糖。

该酶仅水解IgG上的N-聚糖，即使在其他糖基化蛋白质存在的情况下。该反应在生理条件下快速和温和地进行，不需要去垢剂。

该酶通过减少由补体结合或交叉反应性引起的各种免疫测定中的副作用而成为一种有效的工具。

划重点

     · 特异作用于Fc聚糖

     · 快速去糖基化，操作时间仅30分钟

     · 血清中也有活性

冻干粉——

IgGZERO 特异性水解IgG F c结构域上的N-聚糖。该酶以冻干粉的形式供应。

deGlycIT是固定在琼脂糖上的IgGZERO，可以快速和选择性去除Fc上的N-聚糖。提供的离心柱预先填充有固定化IgGZERO，可用于少量甚至高达数百mg抗体的去糖基化。

GlycINATOR（EndoS2）   VS    IgGZERO（EndoS）

IgGZERO(EndoS)GlycINATOR(EndoS2)快速水解IgG 的Fc 结构域上的N-聚糖。 

GlycINATOR 可以去除人IgG 上的所有高甘露糖型聚糖，但是IgGZERO不能。两种酶均可除去复杂型聚糖，而GlycINATOR 对杂合型聚糖更有效。

西妥昔单抗（Cetuximab）的去糖基化

为了比较IgGZERO和GlycINATOR对N-聚糖的特异性，分别用这两种酶对西妥昔单抗进行去糖基化。抗体去糖基化后，用FabRIC ATOR水解为F（ab ’）2和Fc片段。西妥昔单抗含有高甘露糖型聚糖。

反应30分钟后，这些高甘露糖型聚糖可以被GlycINATOR切除，但IgGZERO却不能。

用反相高效液相色谱（RP-HPLC）分析去糖基化

The removal of glycans on Fc is seen as a shift in retention time in reversed phase chromatography. Chromatogram A: Fc with intactN-glycans, Chromatogram B: IgG deglycosylated with GlycINATOR, Chromatogram C: IgG deglycosylated with IgGZERO.

看完这篇内容，相信大家对IgGZERO(EndoS)和GlycINATOR（EndoS2）有了更深刻的了解，实验前可不要选错了内切糖苷酶哦~